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        超滤离心管的分子量选择及使用前预处理方法介绍
        点击次数:1408 发布时间:2021-04-13
          超滤离心管常用于做细胞培养上清的蛋白浓缩的实验,它会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),这就是超滤的原理。
          首先要为大家介绍的是超滤离心管的分子量选择:
          按照样品量和目标分子量选择适当的离心超滤管,为了得到收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的离心超滤管多次重复加样离心。
          如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到离心超滤管大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然高品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免接触膜表面。
          那么,在使用超滤离心管时需不需要进行预处理呢?
          通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。对本产品表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。
          希望上述内容能够帮助大家更好的了解本产品的相关知识。
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